濕熱滅菌的原理是使微生物的蛋白質(zhì)和核算變性導(dǎo)致微生物死亡。
濕熱滅菌分為過度殺滅法和殘存概率法。
? 過度殺滅法：被滅菌物品獲得F0值至少為12分鐘的滅菌程序。
注意這個(gè)定義里面包含一個(gè)假設(shè)條件，即物品初始含菌量小于等于1000000，并且微生物D值小于等于1。這就是GMP附錄1第五十八條要求制藥企業(yè)監(jiān)測滅菌前產(chǎn)品生物負(fù)荷的原因。
歐盟對(duì)過度殺滅法的定義是：121攝氏度下濕熱滅菌15分鐘。
??殘存概率法：不耐熱物品考慮使用殘存概率法滅菌程序，需研究物品生物負(fù)荷和耐熱性來設(shè)計(jì)滅菌程序，保證PNSU小于0.000001。
PNSU（probability of non-sterile unit），翻譯為非無菌單元概率。
注意這個(gè)定義是概率，而不是數(shù)值。千萬不能簡單的理解成提供一百萬瓶無菌制劑可以允許一瓶染菌。否則你會(huì)死的很慘。
濕熱滅菌的理論基礎(chǔ)：單位時(shí)間內(nèi)被殺滅的微生物數(shù)正比于t0時(shí)原有的數(shù)目。
D值：在一定溫度下將微生物滅菌90%（即下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位）所需的時(shí)間。
D值表示時(shí)間，單位一般用min。
D值是微生物的耐熱參數(shù)，不同的微生物的D值不同。
D值越大，微生物越耐熱。
相同微生物在不同溫度下的D值不同。
相同微生物在不同溶液中、不同溫度下的D值也不同。
從下圖可以看出，溫度越高，直線越陡，下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位所需時(shí)間越短，即D值越小。
Z值：滅菌溫度系數(shù)，系指使某一種微生物的D值變化一個(gè)對(duì)數(shù)單位，滅菌溫度應(yīng)升高或下降的度數(shù)。
Z值表示溫度變化，單位一般用攝氏度。
Z值越大，微生物對(duì)溫度變化的敏感性越弱。
Z值的作用是轉(zhuǎn)換計(jì)算不同溫度下的殺滅微生物的效果。
Z值可以通過耐熱性曲線法實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)計(jì)算得到，Z值是耐熱性曲線斜率的負(fù)倒數(shù)。
F0值：Z值10℃時(shí)，一定滅菌溫度（T）產(chǎn)生的滅菌效果與121℃產(chǎn)生的滅菌效力相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間。
F0值表示時(shí)間，單位一般用min。
干熱滅菌的原理是利用高溫使微生物的脫氧核糖核酸等高分子產(chǎn)生非特異性氧化而殺滅的方法。
干熱滅菌并不嚴(yán)格服從對(duì)數(shù)下降規(guī)則。
用于計(jì)算Fh值的Z值通常取20攝氏度（PDA TR3,2013）
用于計(jì)算除熱源工藝的Z值通常不低于46.4攝氏度（PDA TR3,2013）
討論
? 115攝氏度滅菌30分鐘的滅菌工藝算不算最終滅菌？
這個(gè)問題的答案對(duì)于老板很關(guān)鍵，涉及到潔凈廠房設(shè)計(jì)成B+A還是C+A，兩者潔凈工程建造成本和日常運(yùn)行成本都差距很大。你替老板省錢，你就有錢途。
滅菌段 F0 = 0.251×30 = 7.53
積分累加上升溫段和降溫段F0達(dá)到11.4
115攝氏度滅菌30分鐘，實(shí)際滅菌溫度會(huì)略高于115，最后滅菌F0值可能會(huì)大于12min。這與滅菌柜的性能有關(guān)。
筆者認(rèn)為從科學(xué)的角度來講，升溫段和降溫段的F0值貢獻(xiàn)不置可否，所以115攝氏度滅菌30分鐘的滅菌屬于最終滅菌。
滅菌決策樹
無菌產(chǎn)品開發(fā)可能會(huì)用到滅菌方法選擇決策樹，下面兩張圖摘選自《藥品GMP指南2010版》。
滅菌時(shí)間計(jì)算
不同滅菌溫度的選擇對(duì)應(yīng)不同的滅菌時(shí)間，用對(duì)數(shù)函數(shù)公式手工計(jì)算非常麻煩，群友shark設(shè)計(jì)了Excel表格，填寫滅菌溫度后自動(dòng)計(jì)算出最小滅菌時(shí)間。
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滅菌相關(guān)參考書
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致謝：感謝濤哥、美發(fā)的認(rèn)真校稿。
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